21. Cho tôi hỏi phương pháp kiểm tra mức độ nhiễm bẩn và khả năng chịu nhiệt (giá trị D) của vi sinh vật trước khi khử trùng?
Trả lời: mức độ ô nhiễm vi sinh vật thường được ngăn chặn bằng cách lọc màng, sau đó chuyển lên bề mặt môi trường rắn, nuôi cấy và đếm. Khối lượng lọc và số lượng vi sinh vật bị chặn phải được thanh toán để đảm bảo đủ tỷ lệ phát hiện (đủ hệ thống lọc) và tính đếm được (có thể đếm được quá nhiều vi sinh vật bị chặn).
22. Cách tính lượng chất cấy theo giá trị D?
Ni là số lượng bào tử ưa nhiệt cấy chỉ thị sinh học; Không có giới hạn vi sinh vật bị ô nhiễm trước khi khử trùng; Do là giá trị D tối đa cho phép của vi sinh vật bị ô nhiễm; Di là giá trị D của bào tử tản nhiệt chỉ thị sinh học -.
23. Đối với sản phẩm cuối cùng được tiệt trùng bằng phương pháp xác suất dư, nếu vi sinh vật của mỗi lô bị giới hạn trước khi tiệt trùng và thời gian thử nghiệm giới hạn là 72 giờ, trong khi chu kỳ sản xuất liên tục thực tế ngắn hơn nhiều là 72 giờ thì kết quả thử nghiệm chỉ mang tính chất tham khảo. đến mức đảm bảo vô trùng của sản phẩm tiệt trùng?
Trả lời: Rõ ràng là kết quả kiểm tra hàm lượng vi sinh vật trước khi khử trùng tụt hậu so với quy trình sản xuất và không nhằm mục đích kiểm soát trung gian đối với lô sản phẩm hiện tại.
Ý nghĩa của việc kiểm tra: thứ nhất để đánh giá mức độ đảm bảo vô trùng của lô sản phẩm này; thứ hai, sau khi tích lũy dữ liệu về hàm lượng vi sinh vật cho nhiều lô trước khi tiệt trùng trong một thời gian dài, tình trạng nhiễm vi sinh vật của từng quy trình của hệ thống sản xuất trước khi tiệt trùng có thể được đánh giá toàn bộ, để cho biết liệu hệ thống sản xuất có thể kiểm soát hiệu quả sự ô nhiễm vi sinh vật ở một mức độ tốt và liệu nó có cần được cải thiện hay không.
24. Cho tôi hỏi phương pháp nghiên cứu loài và số lượng vi sinh vật? Các thiết bị cần thiết? Nếu áp dụng phương pháp xác suất thặng dư, thì có cần xác định mức độ vi sinh vật trong quá trình sản xuất hay không, và chi phí sẽ tăng lên bao nhiêu nếu đưa vào sản xuất? Là một nhà sản xuất dịch truyền lớn, có nên thành lập phòng thí nghiệm vi sinh đặc biệt để phát hiện mức độ nhiễm vi sinh trước khi tiệt trùng bằng phương pháp xác suất dư không?
Trả lời: Mức độ ô nhiễm vi sinh vật - tức là số lượng có thể được kiểm tra theo phương pháp kiểm tra giới hạn vi sinh vật trong Dược điển; Các loài vi sinh vật có thể được xác định lần lượt từ các khía cạnh sau:
1) Quan sát hình thái khuẩn lạc bằng mắt thường;
2) Hình thái và khả năng di chuyển trên kính hiển vi;
3) Xét nghiệm sinh hóa tổng quát: nhuộm gram hoặc xét nghiệm KOH 3%;
4) Nhận dạng sinh hóa (đó là thử nghiệm API) để xác định loài
Khi sử dụng phương pháp xác suất còn sót lại, cần phát hiện mức độ nhiễm vi sinh vật của sản phẩm trước khi tiệt trùng, bao gồm kiểm tra độ sôi của vi khuẩn bị ô nhiễm (ví dụ: 100 độ, 15 phút) và số lượng vi sinh vật.
Phòng thí nghiệm vi sinh rất cần thiết cho các nhà sản xuất thuốc tiêm, và các chức năng cơ bản của nó phải bao gồm kiểm tra giới hạn vi sinh vật đối với nguyên liệu thô và phụ, kiểm tra độ nhiễm vi sinh vật trước khi tiệt trùng, kiểm tra vô trùng sản phẩm, kiểm tra nội độc tố vi khuẩn, kiểm tra động lực học của môi trường sản xuất (đếm hạt không khí, vi khuẩn nổi và lắng vi khuẩn). Các phòng thí nghiệm đủ điều kiện cũng có thể thực hiện các công việc sau: xác định vi sinh vật (đề nghị phòng thí nghiệm trung tâm của tập đoàn thực hiện nhận dạng API), hiệu chuẩn các chất chỉ thị sinh học (nghĩa là xác định giá trị D, đề nghị phòng thí nghiệm trung tâm của nhóm doanh nghiệp thực hiện công việc này).
25. Có cần thiết phải xác minh quy trình khử trùng cho hơn - phương pháp khử trùng không? Sự khác biệt giữa quá trình nghiên cứu và phát triển sản phẩm và xác minh trong sản xuất thực tế của phương pháp xác suất thặng dư là gì?
Trả lời: tất nhiên, cần phải xác minh. Điều 83 của Phụ lục CGMP của EU: tất cả các quá trình tiệt trùng phải được xác minh. Phương pháp xác suất dư là thiết kế của quá trình tiệt trùng, bản thân nó cần được kiểm tra và xác nhận.
26. Phương pháp diệt qua - có chắc chắn rằng không cần thử nghiệm vi sinh vật không?
Trả lời: Nội hàm của phương pháp giết quá - là số lượng vi sinh vật trong sản phẩm giảm đi 12 logarit và thử nghiệm thử thách vi sinh vật là để chứng minh rằng xác suất còn lại của vi sinh vật không quá 10 - 6, vì vậy phương pháp giết chết quá mức không thể thực hiện các thử nghiệm thách thức vi sinh vật.
27. Sản phẩm tiệt trùng cuối cùng có phải được kiểm định thiết bị riêng cho từng giống đăng ký không? Có thể xác minh thiết bị chỉ một lần và các giống khác có thể được sử dụng phổ biến không? Dữ liệu xác minh thiết bị có thể không được đính kèm với dữ liệu xác minh giống mà chỉ để tham khảo lưu trữ không?
Trả lời: Sản phẩm khử trùng cuối cùng không cần phải thẩm định riêng cho từng giống đăng ký. Nếu giống đã đăng ký áp dụng các điều kiện khử trùng tương tự hoặc thấp hơn thì chỉ có thể thực hiện việc kiểm định thiết bị trong điều kiện khử trùng ở nhiệt độ cao hơn; dữ liệu xác minh thiết bị đối với các điều kiện khử trùng của giống cũng phải được đính kèm với dữ liệu xác minh của giống.
28. Quy trình tiệt trùng của dạng bào chế không phải - dung dịch, bán - rắn hoặc bột tiêm có thể tính giá trị tương tự như F 0 không? Bạn có thể tính được SAL không? Quy định cụ thể là gì?
Trả lời: Không thể, nhưng có thể tính được SAL. Tham khảo - cây đưa ra quyết định về lựa chọn quy trình khử trùng của Liên minh Châu Âu.
29. Về việc kiểm tra chiết rót môi trường nuôi cấy xác nhận dây chuyền sản xuất hay sản phẩm đã công bố (mỗi sản phẩm phải làm ba lô để kiểm chứng), cho tôi hỏi?
(1) Việc xác minh dây chuyền sản xuất có thể thay thế việc kiểm tra độ lấp đầy của sản phẩm đã công bố (giống tương tự) không?
(2) Bạn muốn loại phương tiện nào, thioglycolat và Martin biến tính?
(3) Liệu có yêu cầu ba lô kiểm tra chiết rót đối với các quy cách đóng gói khác nhau trong quá trình kiểm tra GMP hay không?
Trả lời: (1) Thử nghiệm mô phỏng làm đầy môi trường nuôi cấy nên được thực hiện theo các sản phẩm, quy cách đóng gói và hình thức đóng gói khác nhau. Ví dụ, nếu sản phẩm là bột tiêm, thử nghiệm làm đầy mô phỏng của môi trường thường sẽ làm đầy môi trường lỏng trước, và sau đó điền vào bột vô trùng của sản phẩm mô phỏng (chẳng hạn như bột vô trùng PEG); nếu tiêm vô trùng hoặc tiêm bột đông khô -, chỉ cần đổ đầy môi trường lỏng; nếu quy cách đóng gói là 2ml, 5ml, 10ml, thì ngay cả khi cùng một sản phẩm cần thực hiện thử nghiệm chiết rót mô phỏng môi trường riêng. Nếu bao bì ở dạng chai lọ hoặc các dạng khác (chẳng hạn như ống tiêm, ống tiêm chứa - trước), thì các phép thử mô phỏng làm đầy môi trường nuôi cấy phải được thực hiện tương ứng do sử dụng các dây chuyền sản xuất khác nhau.
Diana
(1) Trong công việc cụ thể, xem xét thử nghiệm chiết rót mô phỏng vừa thực sự là kiểm tra xác nhận có hệ thống toàn bộ dây chuyền sản xuất, bao gồm thiết bị sản xuất, môi trường và vận hành nhân sự, v.v., nếu thử nghiệm chiết rót mô phỏng trung bình được thực hiện với điều kiện tồi tệ nhất Điều kiện, đó là chai lớn nhất, tốc độ chiết rót chậm nhất, nhân công nhiều nhất, thời gian kéo dài hơn thời gian sản xuất bình thường, v.v., sau đó kiểm tra mô phỏng trung bình của từng sản phẩm, từng đặc điểm kỹ thuật có thể cũng được thực hiện mà không cần thiết; nếu nó không phải là tình trạng xấu nhất, nó nên được thực hiện điều kiện, nó nên được thực hiện theo sản phẩm ,.
(2) Môi trường phổ - rộng thường được sử dụng để thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn gram - dương, âm, nấm men và nấm mốc, chẳng hạn như môi trường tryptone đậu nành và môi trường kỵ khí chỉ được sử dụng trong những trường hợp đặc biệt.
(3) Chỉ tại thời điểm xác minh đầu tiên, mỗi thông số kỹ thuật yêu cầu ba lần thử nghiệm lấp đầy mô phỏng trung bình thành công liên tiếp, tiếp theo là hai lần tiếp theo mỗi năm và một đợt thử nghiệm lấp đầy mô phỏng trung bình mỗi lần.
30. Việc quan sát hiệu quả vô trùng của màng lọc trong quá trình khử trùng và lắp đặt trong thử nghiệm chiết rót môi trường, sau khi khử trùng môi trường, trước khi chiết rót, sau đó lọc qua màng lọc có khả thi không?
Đáp: Thử nghiệm chiết rót trung bình là một cuộc điều tra về mức độ đảm bảo vô trùng của tất cả các bước, bao gồm cả quá trình lọc vô trùng. Khuyến cáo rằng môi trường được chuẩn bị và sử dụng trực tiếp trong quá trình lọc vô trùng và các quy trình chiết rót tiếp theo. Trong thực tế, cần chú ý tránh để các hạt không tan làm tắc màng lọc.
31. Có bao nhiêu đợt kiểm tra điền đầy trung bình được - xác nhận lại hai lần một năm?
A: để đánh giá lại sản phẩm hàng năm, thông lệ thường là tiến hành các thử nghiệm chiết rót trung bình hai lần một năm, mỗi đợt.
32. Thời gian nuôi cấy vô trùng của Dược điển Trung Quốc phiên bản 2005 đã thay đổi thành 14 ngày. Có cần phải kéo dài thử nghiệm nuôi cấy ở hai nhiệt độ sau khi môi trường được mô phỏng và lấp đầy không?
A: tổng thời gian nuôi cấy không được ít hơn 14 ngày. Nó có thể được chia thành hai nhiệt độ (22,5 độ và 32,5 độ) trong ít nhất 7 ngày, hoặc một nhiệt độ (22,5 độ) để nuôi cấy trực tiếp.
33. Hãy giải thích phương pháp thống kê nào được sử dụng và cách tính bảng.
Answer: the detailed explanation of the calculation formula, can refer to the State Food and Drug Administration Drug Safety Supervision Department and Drug Certification Administration Center organized by the "Drug production Verification Guide (2003)"(Chemical Industry Press) a book 258.
There are two calculation methods. One is to use the approximate formula of Poisson distribution, that is, P (X >0)=1- e-Np>{{0}}. 95, trong đó P là giới hạn tin cậy, N là số chai hoặc lô được mô phỏng, 0,1 phần trăm (xác suất ô nhiễm)
The other method is a more accurate binomial formula, that is, P (X>{{0}}) =1- (1- X), trong đó P là giới hạn tin cậy, N là số chai hoặc lô và 0,1 phần trăm (xác suất ô nhiễm)
Trên trang 259 của cuốn sách, có một bảng về mối quan hệ giữa số lượng đóng gói mô phỏng, số lượng ô nhiễm và xác suất ô nhiễm trong một bao bì mô phỏng với giới hạn tin cậy 95 phần trăm.
34. Trong phim thứ năm mươi - trên trang 72 của tài liệu phát tay, có đề cập đến sự khác biệt trong quy trình chiết rót trung bình về sự giống và khác nhau trong quá trình xác minh quy trình tiêm bột, đông lạnh - bột khô tiêm và tiêm thể tích nhỏ chủ yếu là gì, như thế nào, ở đâu và kết thúc ở đâu?
Trả lời: đối với thuốc tiêm dạng bột vô trùng, hình thức chiết rót vừa có một số đặc thù, nếu muốn pha chế dạng bột vô trùng mô phỏng, sau khi đóng gói cho môi trường lỏng vào chai có ống tiêm; hoặc chia bột môi trường vô trùng riêng, Thêm nước tiêm vô trùng bằng bơm tiêm sau khi hoàn thành. Tuy nhiên, mục đích là để điều tra mức độ đảm bảo vô trùng của toàn bộ quy trình đóng gói vô trùng.
35. Làm thế nào để xác minh niêm phong của container?
A: các phương pháp vật lý và vi sinh thường được sử dụng để kiểm tra việc niêm phong thùng chứa. Phát hiện vật lý có nhiều ưu điểm, chẳng hạn như độ nhạy cao, sử dụng thuận tiện, phát hiện nhanh chóng và chi phí thấp. Trong thời gian hiệu lực của sản phẩm, các phương pháp thử nghiệm vật lý có thể được sử dụng để xác định xem tính toàn vẹn của bao bì có đáp ứng các yêu cầu quy định hay không. Một lý do quan trọng để kiểm tra tính toàn vẹn của bao bì là để đảm bảo rằng các sản phẩm vô trùng vẫn vô trùng.
Do đó, trong giai đoạn nghiên cứu và phát triển bao bì sản phẩm, chúng ta nên cân nhắc sử dụng phương pháp thử xâm nhập của vi sinh vật hoặc phương pháp thử vật lý đã được chứng minh và hiệu quả hơn phương pháp phát hiện vi sinh vật để phát hiện tính nguyên vẹn của bao bì sản phẩm. Tuy nhiên, đối với việc kiểm tra độ ổn định của sản phẩm trong thời kỳ hiệu lực, rất khó thực hiện kiểm tra sự xâm nhập của vi sinh vật, vì vậy đề xuất áp dụng phương pháp phát hiện vật lý. Thử nghiệm xâm nhập của vi sinh vật là một thử nghiệm đầy thách thức đối với tính toàn vẹn của hệ thống niêm phong / thùng chứa tiệt trùng cuối cùng. Trong quá trình kiểm tra xác nhận, lấy chai dịch truyền hoặc chai (lọ) cillin, đổ đầy môi trường vào và khử trùng nút và nắp trên dây chuyền sản xuất bình thường. Sau đó, bề mặt niêm phong thùng chứa được ngâm trong dung dịch vi khuẩn di chuyển nồng độ cao, và vi sinh vật xâm nhập được đưa ra ngoài, nuôi cấy và kiểm tra để xác nhận tính toàn vẹn của hệ thống niêm phong thùng chứa. Đồng thời, cần kiểm tra đối chứng dương tính để khẳng định khả năng sinh trưởng của môi trường nuôi cấy.
36. Trong việc sử dụng ngâm vi sinh để kiểm định độ kín của thùng chứa, tại sao khi tháo nắp nhôm trước, sau khi tháo nắp nhôm ra chỉ có nút cao su, như vậy trong quá trình kiểm tra sẽ có hiện tượng rò rỉ chất lỏng và ảnh hưởng kết quả xác minh?
A: việc loại bỏ lớp vỏ nhôm là để tạo ra một điều kiện nghiêm ngặt hơn. Trong bài giảng, phương pháp tiêm bột khô đông lạnh - được lấy làm ví dụ. Thông thường, có độ chân không cao trong bình chứa, điều này sẽ không gây rò rỉ. Người kiểm tra có thể đánh giá xem việc loại bỏ lớp vỏ nhôm có áp dụng được hay không tùy theo đặc tính của sản phẩm của mình.
37. Trong xác nhận khả năng niêm phong, chẳng hạn như xác nhận của trống nhôm, kết quả không thể được quan sát bằng cách xác minh trung bình. Có phương pháp nào khác không?
A: Đối với các thùng chứa nguyên liệu vô trùng, nên thử các phương pháp vật lý, chẳng hạn như ngâm nước muối.
38. Lượng lấy mẫu chung cho mỗi lần xác nhận rò rỉ và khoảng thời gian đánh giá lại là bao nhiêu?
Trả lời: có thể lấy ít nhất 10 chai từ đầu, giữa, cuối của tuyến mang đi kiểm tra, việc xác minh bắt đầu nên điều tra tính chất niêm phong của các thời điểm khác nhau trong thời hạn hiệu lực, sau đó xác minh xem có thể tiến hành không mỗi năm một lần.
39. Có các yêu cầu trong hướng dẫn xác nhận đối với việc xác minh khả năng niêm phong của các sản phẩm truyền dịch lớn, nhưng không có yêu cầu nào đối với các sản phẩm sấy khô - đóng gói và đông lạnh - phụ. Không cần xác minh khả năng niêm phong?
A: tiêm khối lượng lớn, tiêm khối lượng nhỏ, tiêm bột nên được xác minh niêm phong thùng chứa.
40. Có phải kiểm tra độ kín của bình chứa trong tất cả các công thức thuốc tiêm, chẳng hạn như ống thuốc và chai nước muối sinh lý không?
A: Thử nghiệm niêm phong vật chứa phải được thực hiện ở tất cả các dạng liều tiêm như ống thuốc và chai nước muối. Tuy nhiên, các phương pháp được sử dụng là khác nhau. Phương pháp kiểm tra vật lý thường được sử dụng trong ống thuốc, và phương pháp vật lý và vi sinh được sử dụng trong chai cillin.